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问题
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原因
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防止方法
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问题
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原因
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防止方法
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显 色 淡 灵 敏 度 偏 低 |
1、试剂盒在运输途中时间太长,温度太高
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试剂盒务必置于保温箱内运输,并放足够数量的冰块,尽量缩短运输时间。
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重 复 性 差 |
15、其它杂物掉入孔内
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用记号笔圈上便于分析。
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2、试剂盒超过有效期
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不要用超过有效期的试剂盒
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16、不慎多加酶或滴于孔壁上,有残留
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用吸水纸吸干壁上残留的酶或底物液。
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3、试剂、样品使用前未能平衡
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使用前试剂样品置室温平衡30分钟左右。
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17、不慎多加或少加酶或显色剂
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多加时显色深,少加则浅,用记号笔圈上,便于分析。
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4、试用开启时间过长、长菌
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试剂开启后请于半个月内用完
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18、阈值附近时阴时阳
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重复做奇数次,以偶数次结果为准。
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5、移液器吸量不足,移液抽吸排放太快,吸头内壁挂液太多或内壁不清洁。
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校正移液器,吸头要配套,每次装吸头要吻合紧密,移液不宜过快,排放应完全。吸头内壁要清洁,最好一次性用完。
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19、标本离心处理不全,致使检测时反应孔内发生凝血现象或残留细胞成分干拢
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血清或血浆应充分离心处理,3000rpm6分钟以上,
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6、恒温箱温度不足37oC(或水浴锅温度不足37oC)
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孵育反应期间控制好温度。
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出 现 白 板 、 阳 性 对 照 不 显 色
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1、蒸馏水有问题
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与好的蒸馏水同时比较
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7、孵育反应时间不足
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准确记时
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2、洗涤液配制有误
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按说明书配制。
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8、洗涤时冲击力太大,洗涤液浸泡时间太长。洗涤次数增加
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减少洗涤冲击力。按说明书要求的浸泡时间,准确记住洗涤次数
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3、终止液误作洗涤稀释
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每次配制时均应看清标签
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9、显色剂滴加量不足或顺序颠倒,或混后加入
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滴加显色液时,滴瓶垂直向下,用力均匀,滴速不宜过快,先加显色剂A,后加显色剂B,不可将A、B液混合加入
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4、终止液当显色剂使用
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注意滴瓶标签
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10、显色剂反应时间不足
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准确记时
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5、添加酶
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注意不要漏加
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11、蒸馏水水质有问题
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检查蒸馏水水质。
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6、添加显色剂A或B
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加显色剂后观察一下液面高度。
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12、样品用NAN3防腐,抑制了酶的反应
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样品不能加NaN3防腐。
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全
部
呈
有
色
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1、水质问题
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避免蒸馏水污染
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重 发 性 差
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1、样品加入量多少不一,加样时间有长有短
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重复某一样品尽可能与第一次接近
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2、酶加量过多
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加酶前验看移液器调节是否正确。
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2、样品加入后未混匀
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加样后充分混匀
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3、恒温箱温度超37oC。酶结合物反时间或底物显色时间超过时间较多
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放入板之前要验看恒温箱温度,准确定时
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3、移液器加样量不一致
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尽可能使用同一移液器和装紧吸头。移液时用力及抽吸速度一致
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4、洗涤不充分、反应孔中其它成分残留,或酶残留
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充分洗涤
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4、测量波度不对
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按说明书严格操作
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5、显色剂受光照时间较长或污染
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显色剂A或B应于使用前10分钟从冰箱取出。
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5、酶标仪重复性差
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校准酶标仪
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6、整批样品放置时间过长、样品污染
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样品应保持新鲜,或低温保存,防止污染。
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6、操作过程个别孔液体外溅
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稳拿稳放,防止外溅
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7、吸头重复使用,未洗净或消毒不完全而用于加酶或显色剂
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吸头尽可能一次性能使用
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7、不同批号试剂盒中组份混淆
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不同批号试剂组份不能混用。
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花
板
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1、操作不慎
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按说明书洗板,加样
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8、瓶盖相互交叉使用
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不同组份的瓶盖不能交叉使用
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2、洗板机孔堵,残留液较多。加洗液及抽吸液不均匀
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显色,洗板步骤尤为重要检查洗板机,并进行调整。
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9、保温时间不一致
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重复测定标本,各项条件应尽可能保持致,以消除可能产生的误差。
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3、样品离心处理不全,反应孔内发生凝血或残留细胞成分
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充分离心,3000rpm6分钟以上
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10、洗涤条件不一致辞
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重复测定标本,各项条件应尽可能保持致,发消除可能产生 的误差。
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11、显色条件时间不一致
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重复测定标本,各项条件应尽可能保持致,以消除可能产生的
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1、 若不同批号试剂的不同组分(B液。酶结合物)、或不同试剂的不同组分进行交叉使用,有可能出现显色浅或本底高、花板等情况。
2、 若逐一排除可能因素仍出现上述情况,可与另一批号试剂盒进行对照以排除试剂盒质量问题。
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12、操作人员不一致
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重复测定标本,各项条件应尽可能保持致、以消除可能产生的误差。
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13、洗涤不正确
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尽量使用洗板机洗涤。手洗时应尽量避免交叉污染。
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14、温育条件不一致(如:一次用水浴,一次用恒温箱)
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恒温箱温育较水浴显色深,最好采用恒温箱,没有恒温箱者,水浴锅的水温应控制在37oC
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